红细胞裂解液试剂的使用注意事项

利用低渗作用：红细胞细胞膜结构脆弱，在低渗环境下快速吸水膨胀破裂；白细胞、肿瘤细胞、免疫细胞耐受更强，可保持完整，后续离心即可去除裂解碎片与血红蛋白。

红细胞裂解液试剂的使用要点：

新鲜血液样本先按1:3~1:10比例加入预冷裂解液，冰上孵育5~10分钟，期间轻柔颠倒混匀；

裂解完成后离心，弃上清去除裂解的红细胞碎片，沉淀即为有核细胞；

若红细胞残留较多，可重复裂解1次，避免残留红细胞影响后续实验；

实验结束后用PBS清洗细胞1~2次，去除残留裂解液，避免影响细胞活性。

注意事项：

推荐冰上操作，室温长时间孵育会导致裂解液渗透压改变，损伤有核细胞；

处理不同样本调整比例：全血一般1:5~1:10，脾脏/骨髓组织单细胞悬液一般1:3~1:5；

敏感细胞裂解时间要适当缩短，避免过度裂解影响细胞活性；

废液含有生物污染物，需按生物废弃物规范处理。